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ELISA試劑盒細胞裂解液和組織勻漿液的細節(jié)處理

日期:2025-02-16 16:28
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摘要:ELISA試劑盒細胞裂解液和組織勻漿液的細節(jié)處理因為酶免ELISA試劑盒只能查看可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證一切樣本均為澄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心 去掉。為了保證查看的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本*好在1~6個月內(nèi)查看;4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進行查看。別的,還應(yīng)保證樣本不含NaN3,因為NaN3會按捺HRP的活性,然后致使假陰性的成果。

ELISA試劑盒細胞裂解液和組織勻漿液的細節(jié)處理

因為酶免ELISA試劑盒只能查看可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證一切樣本均為澄清的液體,沉積或懸浮物都應(yīng)離心
去掉。為了保證查看的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本*好在1~6個月內(nèi)查看;4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進
行查看。別的,還應(yīng)保證樣本不含NaN3,因為NaN3會按捺HRP的活性,然后致使假陰性的成果。  
一、ELISA試劑盒細胞裂解液的細節(jié)處理:  
1. 吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基,用胰酶消化細胞,加恰當培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省掉。  
2. 收集細胞懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤洗3次。  
3. 參與恰當?shù)念A(yù)冷PBS或細胞裂解液(臨用前參與蛋白酶按捺劑)重懸細胞。一般6孔板一個孔的細胞量需求150~
250μL PBS重懸。  
4. 將樣品放入-20℃或-80℃,使樣品冷凍,再放室溫凍住樣品,重復凍融幾回,使細胞充分裂解。也可將樣品進
行超聲破碎,以抵達裂解的目的。  
5. 4℃10000×g離心10min,除掉細胞碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。 
二、酶免ELISA試劑盒組織勻漿液的細節(jié)處理:
1. 將組織樣本用PBS(0.01M, PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。
2. 將組織塊稱重,記載后剪碎,碎塊應(yīng)盡量小,便于勻漿得更充分
3. 將組織按必定的比例參與預(yù)冷的PBS(臨用前參與蛋白酶按捺劑)勻漿,勻漿時置于冰上或冰浴中。
4. 羅致勻漿液到離心管,4℃5000×g離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免重復凍融。

滬公網(wǎng)安備 31011702004399號

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