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怎樣才能選到合適的酶標板

日期:2025-04-01 01:16
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摘要:怎樣才能選到合適的酶標板高結合力:外表經處理后,其蛋白結合才能大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,首要結合的蛋白分子量>10kD。 運用該類酶標板可進步敏感性,并可相對削減包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發作非特異性反響。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地關閉未結合蛋白的部位,需運用蛋白作為關閉劑。

                          怎樣才能選到合適的酶標板

一:依據酶標板與蛋白和其它分子結合才能的不同,分為高結合力、中結合力和氨基化
高結合力:外表經處理后,其蛋白結合才能大大增強,可達300~400ngIgG/cm2,首要結合的蛋白分子量>10kD。
運用該類酶標板可進步敏感性,并可相對削減包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發作非特異性反響。抗原或抗
體包被后,以非離子去污劑無法有效地關閉未結合蛋白的部位,需運用蛋白作為關閉劑。
中結合力:經外表疏水鍵被迫與蛋白結合,合適作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合才能為
200~300ng IgG/cm2。該類板能夠慵懶蛋白或非離子去污劑作為關閉液。
氨基化:經外表改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板合適作為小分子蛋白的固相
載體。運用合適的緩沖液和pH值,其外表可經過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其外表的親水特性和可經過
其它交聯劑共價結合的才能,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺點為由于
降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其外表需有效地關閉。由于親水和共價的外表特性,運用的關閉液
必須能夠與非反響性氨基基團和所挑選的交聯劑中任何功用基團發作效果。
 
二:依據酶標板底部的不同,能夠分為平底、U型底、V型底
  平底的折射率低,適于在酶標儀檢測;U型底的酶標板折射率較高,便利加樣、吸樣、混勻等操作,能夠不用放在
酶標儀上,直接經過目測觀察色彩改變情況,然后斷定有無相應的**反響。V底的酶標板能夠準確的汲取樣品。
 
三:依據色彩分為通明、黑色、白色
通明的是*常用的,用于*一般的酶聯**試驗。相對于通明的的板子,還有用于發光檢測用的不通明的板子,一
般有黑色和白色兩種。黑色的酶標板本身會有光吸收,所以它的信號相對于白色的板子要低許多,因而一般用于檢
測較強的光,如熒光檢測。而白色的酶標板就用于較弱的光檢測,常用于一般的化學發光。別的黑色的酶標板還能
夠消弱非特異反響帶來的問題。有些客戶會問,用一般的酶標板可不能夠進行發光檢測,回答是不能夠的,由于一般
從化學發光反響中發射出的光是各向同性的,也就是說各個方向上平等發射出來的。如果用通明的板子,光不只會從
垂直方向發散,還從水平方向發散出來。很容易的就會經過各個孔之間的空隙和孔壁。這樣的話,光較強時相鄰孔之
間的影響就會很大,因而不能用通明的酶標板來進行化學發光試驗。當然,現在的酶標板還有可拆開和不行拆開供客

滬公網安備 31011702004399號

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