DC融合疫苗聯合CIK細胞對人胃癌細胞凋亡的影響
蔣麗 李輝 張桂英 穆儀冰 劉海濤
湖南省長沙市第四醫院消化內科中南大學湘雅醫院消化內科
摘要:目的研究樹突狀細胞(DC)融合疫苗與細胞因子誘導殺傷細胞(CIK)共培養對人胃癌細胞凋亡的影響。方法采集胃癌患者外周血單個核細胞(PBMCs)提取誘導生成DC和CIK細胞。聚乙二醇法融合DC與自體胃癌細胞成為融合疫苗。實驗分為3組:DC融合疫苗組(簡稱融合組)、DC組和胃癌組。3組細胞分別與CIK細胞混合培養,流式細胞儀檢測CIK細胞亞群CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+細胞表達率。胃癌細胞與3組混合細胞作用后采用Annexin V-FITC/PI染色法觀察和檢測其凋亡率。Western blot法檢測Raf激酶抑制蛋白(RKP)、NF-κB、Caspase-8蛋白表達。結果胃癌細胞與DC的融合率為26.2﹪,融合DC較未融合DC高表達CD80和CD86(t=74.11、91.84,P<0.05)。與DC組和胃癌組相比,融合組CIK細胞CD3~+CD8~+和CD3~+CD56~+細胞表達率增加(F=60.29、28.68,P<0.05);融合組胃癌細胞凋亡率增加,RKP、Caspase-8蛋白相對含量表達上調,而NF-κB蛋白相對含量表達下調(F=52.63、21.05、29.89、101.58,P<0.05)。結論DC融合疫苗與CIK細胞共培養后能促進CIK細胞成熟,可能通過上調RKP、抑制NF-κB從而上調Caspase-8,促進胃癌細胞凋亡,起到抗腫瘤效應。
基金:湖南省衛生計生委科研計劃課題B類項目(編號:B2016221);
關鍵詞:胃癌; 樹突狀細胞融合疫苗; 細胞因子誘導殺傷細胞; 凋亡; Raf激酶抑制蛋白;
分類號:R735.2