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蛋白純化技術的革新
日期:2024-12-27 23:10
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摘要:
蛋白純化技術的革新
一般來說,不同的組織或細胞中可能同時存在多種蛋白質,蛋白的含量也不盡相同,因此,若生物化學實驗中要對某一特殊蛋白質進行研究,首先要選擇合適的細胞來表達這蛋白,再對其進行蛋白分離純化,蛋白純化工作非常復雜,除了需要實驗者的細致和耐心之外,還需要選擇合適的純化系統。*常被使用的是蛋白親和層析法(affinity chromatography),一般分為以下步驟:
1. 選擇適合標簽來標記目標蛋白
2. 將目標蛋白溫和的從原來的組織或細胞中以裂解出來,使其與適當的配體結合。
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蛋白純化技術的革新
一般來說,不同的組織或細胞中可能同時存在多種蛋白質,蛋白的含量也不盡相同,因此,若生物化學實驗中要對某一特殊蛋白質進行研究,首先要選擇合適的細胞來表達這蛋白,再對其進行蛋白分離純化,蛋白純化工作非常復雜,除了需要實驗者的細致和耐心之外,還需要選擇合適的純化系統。*常被使用的是蛋白親和層析法(affinity chromatography),一般分為以下步驟:
1. 選擇適合標簽來標記目標蛋白
2. 將目標蛋白溫和的從原來的組織或細胞中以裂解出來,使其與適當的配體結合。
3. 進行數次清洗,將其它雜蛋白移除。
4. 將目標蛋白從配體上洗脫下來。
實驗步驟看似簡便,但其中所需細致和精力只有參與實驗的研究人員才能體會,您是否厭倦了蛋白純化后的雜帶?厭倦了為一個純化流程調配多種不同的緩沖液溶劑?厭倦了為了后續實驗需要在目標蛋白上接入多種標簽?
第三代Strep-tag®系統:「Strep-Tactin®XT:Twin-Strep-tag®」蛋白純化系統,能有效提升您目標蛋白的純度,解決您實驗中所遇到的常見問題。
STREP-TACTIN®XT:目標蛋白純度>95%
純化出純度極高的融合蛋白是Strep-tag®系統的*主要特點,優于其他親和純化系統,如常見的His-tag。上圖展現了STREP-TACTIN®XT的純化程序,利用第三代Strep-tag®系統僅需進行一次純化程序,不需另使用其他純化手續就可得到高純度的目標蛋白。而新一代的Strep-tag®系統,因Strep-Tactin®XT與Twin-Strep-tag®的**親和力,還可應用于變性條件下的純化、批量純化、高通量篩選等領域。
STREP-TACTIN®XT:高效率的固定目標蛋白
由于Strep-Tactin®XT與Twin-Strep-tag®間的親和力**,第三代Strep-tag®系統能夠高效率的固定目標蛋白,純化后能直接將其固定在您所需的介面上,不需另外使用其他親和標簽!
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