人前列腺癌細胞
貨號 KL-006
簡稱 LNCaP
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項:
1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人前列腺癌細胞
細胞介紹
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨**結針刺活檢中分離,該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-α-二氫睪酮(生長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養基變酸。生長很慢,傳代后48小時內不應擾動。當培養瓶封包后,多數細胞從培養瓶底分離,懸浮在培養基中。收到后,在通常培養單層細胞的條件下培養24到48小時,以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。如果需要,培養瓶內容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養液重懸并培養到一個單獨的培養瓶中。請使用Corning的Cellbind培養瓶培養。
人前列腺癌細胞
細胞特性
1) 來源:前列腺;左鎖骨**結癌轉移灶
2) 形態:上皮細胞樣
3) 含量:>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5) 規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
人前列腺癌細胞
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;上等胎牛血清,10%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢查細胞密度。
2)人前列腺癌細胞 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。