人前列腺癌細胞
貨號 KL-008
簡稱 PC-3
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項:
1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人前列腺癌細胞
細胞介紹
PC-3源于一位62歲白人男性前列腺腺癌患者的骨轉移灶,細胞的酸性磷酸酶活性和5-α-睪丸**還原酶活性都較低。
細胞特性
1)來源:前列腺,骨轉移
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5)規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝
人前列腺癌細胞
運輸和保存:使用T25瓶充液發送活細胞。收到細胞后,請先在顯微鏡下檢查細胞生長狀態,并將T25瓶置于培養箱約6h或過夜后,再次檢查細胞狀態。若狀態良好,可進行細胞后續處理操作,按照以下方式進行。若發現可疑污染物,請及時與我們取得聯系。
細胞用途:僅供科研使用。
人前列腺癌細胞
細胞培養步驟
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備F-12K 培養基(F-12K :GIBCO,貨號:21127-022)90%,上等胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢查細胞密度。
2)人前列腺癌細胞細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。