人髓狀甲狀腺腫瘤細胞
貨號 KL-031
簡稱 TT
細胞數 1×106
規(guī)格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項：
1. 收到細胞后，若發(fā)現干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人髓狀甲狀腺腫瘤細胞
細胞介紹
TT細胞由Leong SS等，自一位77歲白人女性甲狀腺髓樣癌患者的穿刺活檢樣本中建立。TT細胞持續(xù)產生高水平的降血鈣素和CEA。更換培養(yǎng)基后24h和72h，在培養(yǎng)基中檢測到的**活性的降血鈣素濃度分別為3900 pg/106個細胞和7700 pg/106個細胞。72小時后CEA積累濃度超過27 ng/106個細胞。
細胞特性
來源：甲狀腺
形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
含量：>1x106 個/mL
污染：支原體、**、酵母和**檢測為陰性
規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接受后的處理：
收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。
請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
人髓狀甲狀腺腫瘤細胞
細胞用途：僅供科研使用。
本公司的細胞培養(yǎng)操作規(guī)程，供參考
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
準備F12K培養(yǎng)基(F12K，SIGMA,貨號N3520，添加NaHCO3 2.5g/L)，90%；上等胎牛血清，10%。。
培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
細胞處理：
人髓狀甲狀腺腫瘤細胞復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。**天換液并檢查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
移入到事先準備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）人髓狀甲狀腺腫瘤細胞細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，*后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
