RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)
細胞名稱:RBL-2H3 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞
組織來源:外周血;化學誘變嗜堿性細胞;白血病
培養條件:MEM +15% FBS(滅活)
形 態:貼壁;成纖維細胞
背 景:RBL-2H3是1978年國立牙科研究所的**學實驗室從Wistar大鼠保持腫瘤狀態的嗜堿性細胞中分離和克隆出來的嗜堿性白血病細胞株。 這些細胞具有高親和力的IgE受體。通過集聚這些受體或與鈣離子載體協同作用可以激活它們分泌組胺及其他遞質。這株細胞廣泛地用于研究肥大細胞FcERI和分泌的生化途徑。 RBL-2H3細胞是研究FcERI結構的模型。它們廣泛地用于研究細胞分泌的不同方面,包括細胞內鈣濃度改變、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。雖然幾乎所有批號的FBS都支持細胞的生長,但在某些批號中FcERI集聚后脫粒化得更好。另一株大鼠嗜堿性細胞株(RBL,ATCC CRL-1378)不會脫粒化。
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)操作說明:
1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養瓶或管是否破損,細胞培養液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態穩定后,即可開始后續操作。選用正確的細胞培養體系,RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)嚴格按照說明書的培養條件進行培養。條件允許,培養的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發送給我們做及時狀態跟蹤。
2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。然后將其復蘇培養,次日更換培養液。
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)注意事項:
1)細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養過程中若出現細胞分布明顯不均時(即某一區域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養基進行培養。
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)下面介紹幾種細胞培養過程中常見的污染:
一)桿菌污染:培養基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。
二)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數情況下是培養用血清。
三)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。
四)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。