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細胞傷口**實驗

日期:2025-04-25 03:59
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摘要:細胞傷口**實驗 DMEM培養基 胎牛血清 PBS BD24孔細胞培養板 Raininpipettips,1ml 戊二醛 乙醇 結晶紫

細胞傷口**實驗

實驗試劑

DMEM培養基

胎牛血清

PBS

BD24孔細胞培養板

Raininpipettips,1ml

戊二醛

乙醇

結晶紫

實驗設備

細胞培養儀:37°Cand5%CO2

實驗材料

人MDA-MB-231cell

實驗步驟

1. 細胞在含有10%FBS的DMEM培養基中生長。

2. 細胞以一定密度接種到24孔細胞培養板中,生長24小時后,單層細胞融合度應達到70-80%。

3. 不要更換培養基。用新的1ml槍頭輕輕的在單層培養細胞間劃痕,劃痕橫穿過孔,槍頭盡量與板孔的底部垂直,不要傾斜。這樣產生的gap的距離才與槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號的槍頭調節。劃痕在同一方向成一條直線。

4. 在垂直與**條劃痕的方向制作另一條劃痕,每孔劃痕成十字交叉型。

5. 劃痕后,用培養基輕輕的清洗板孔2次,以去除脫落細胞。

6. 每孔添加新鮮培養基。

7. (培養基中含有某些成分,如抑制/促進細胞遷移和/或增殖的化學物質)。

8. 細胞生長48小時(或根據時間需要)。

9. 1xPBS清洗細胞兩次,然后使用3.7%多聚甲醛固定30分鐘。

10. 0.1%的結晶紫(2%乙醇溶解)染色30分鐘。

11. 染色的單層細胞選取不同的視野,顯微鏡拍照。gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量.為了降低實驗結果的可變性,建議每孔選擇多個視野觀察,每組做多個重復。

滬公網安備 31011702004399號

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