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原代細胞凍存技術的簡述
日期:2025-03-24 18:48
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摘要:
原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。
原代細胞凍存技術
1、選用生長情況好,數量較多的原代細胞,凍存前**換液一次。
2、貼壁細胞需用0.25%胰酶常規消化將細胞消化下來,將細胞懸液收集至離心管中。
3、1000rpm離心5分鐘,棄上清液。
4、沉淀加含DMSO的培養液,計數,調整至(1-10)×106/ml。
5、將懸液分至凍存管中,每管1 ml。
6、密封凍存管,封口一定要嚴,否則復蘇時易出現爆裂。
7、用記號筆標明細胞種類,凍存日期。
8、按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃過夜)→液氮。
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